近日，根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，农业农村部批准中国农业科学院兰州兽医研究所、天津威特生物医药有限责任公司、瑞普（保定）生物药业有限公司申报的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC阻断ELISA抗体检测试剂盒为新兽药，核发《新兽药注册证书》，具体详见农业农村部公告第449号。
新兽药的基本情况
【兽药名称】口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC阻断ELISA抗体检测试剂盒
【注册分类】三类
【新兽药注册证书号】（2021）新兽药证字46号
【监测期】3年
【研制单位】中国农业科学院兰州兽医研究所、天津威特生物医药有限责任公司、瑞普（保定）生物药业有限公司
【主要成分与含量】 试剂盒中含有如下成分：
【性状】
试剂盒外包装完好，无变形，组分齐全，无破损，无渗漏、标签字迹清晰。其中：
（1）捕获3ABC抗原反应板 2块96孔板，洁净无破损，外包装袋应密封完好，内附2包干燥剂，无杂质吸附。
（2）血清稀释液 透明澄清液体，略带黄色，装量为50ml/瓶，1瓶。
（3）阳性对照血清 透明澄清液体，略带黄色，装量为0.2ml/管，1管。
（4）弱阳性对照血清 透明澄清液体，略带黄色，装量为0.2ml/管，1管。
（5）阴性对照血清 透明澄清液体，略带黄色，装量为0.2ml/管，1管。
（6）100倍浓缩酶标单克隆抗体 透明澄清液体，略带黄色，装量为0.3ml/管，1管。
（7）25倍浓缩洗涤液 无色透明液体，低温下可能出现盐结晶，装量为50ml/瓶，1瓶。
（8）TMB底物溶液 棕色瓶装，无色透明液体，装量为25ml/瓶，1瓶。
（9）终止液 无色透明澄清液体，装量为25ml/瓶，1瓶。
（10）封板膜 完整无破损，4张。
【作用与用途】 用于检测牛、羊和猪血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体。
【用法与判定】
1 用法 撕开试剂盒外包塑封膜，所有的试剂在使用前应先恢复至15℃～25℃，通过涡旋振荡器轻振血清样品混匀。按如下流程操作：
1.1 取出密封的捕获3ABC抗原反应板，沿包装袋切口处撕开，记录每份待测样本与对照血清在酶标板上的加样位置。
1.2 洗涤液准备 用超纯水1︰25稀释25倍浓缩洗涤液至工作浓度（1×洗涤液洗板）。
1.3 加血清 每孔加入80μl血清稀释液，然后依次加入20μl待测血清和阳性、弱阳性与阴性对照血清。待测样本加1孔，阴性、弱阳性与阳性对照血清平行加2孔，振荡混匀，封口膜封口，在15℃～25℃条加下振荡孵育，以水平回转的方式振荡，幅度3.0mm，转速200r/min。检测牛、羊血清时，加血清后置15℃～25℃孵育1小时；检测猪血清时，加血清后置15℃～25℃孵育16～20小时。小心取掉封口膜，每孔加约300μl洗涤液洗板5次，最后一次拍干。
1.4 加酶标单克隆抗体 用血清稀释液1︰100比例稀释100倍浓缩酶标单抗，每孔加入100μl，封口膜封口，置15℃～25℃孵育1小时。小心取掉封口膜，每孔加约300μl洗涤液洗板5次，最后一次拍干。
1.5 加底物 每孔加入100μl TMB底物溶液，封口膜封口，置15℃～25℃避光孵育10～15分钟。
1.6 终止反应测吸光值 每孔加入100μl终止液，置酶标仪测波长450nm吸光值（OD450nm）。
1.7 结果计算 计算阴性、弱阳性与阳性对照血清平均OD450nm值。根据以下公式计算测试样本（弱阳性、阳性对照血清与待测血清）阻断率(PI)，PI=(1–测试样本OD450nm值/阴性对照平均OD450nm值)×100%。
1.8 结果有效性判定 试验成立条件：阴性对照平均OD450nm值应大于1.0；弱阳性对照血清阻断率应大于50%，阳性对照血清阻断率应大于70%。
2 结果判定
2.1 当PI值不低于50%时，判为口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体阳性。
2.2 当PI值小于50%时，判为口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体阴性。
【注意事项】
（1）本品仅用于检测牛、羊和猪血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体，不区分病毒血清型，适用于区分口蹄疫感染动物和疫苗免疫动物。
（2）本品仅用于体外诊断使用，应2℃～8℃冷藏运输。
（3）严格遵守有关生物安全规定，所有口蹄疫病毒感染动物血清，应在生物安全条件下，56 ℃灭活处理30～40分钟。
（4）所有的试剂在使用前应先恢复至15℃～25℃，用涡旋振荡器振荡混匀。
（5）25倍浓缩洗涤液在低温条件下会产生结晶，使用前要温育使其溶解。
（6）注意防止试剂盒成分的污染，不同批次试剂盒成分不要混用，不要使用超过有效期的试剂，未用完的反应板条应加干燥剂密封，连同未使用完试剂放回2℃～8℃保存。
（7）TMB底物溶液对强光和氧化剂敏感，应避光保存，防止氧化剂污染，对皮肤有刺激性。
（8）终止液含0.3mol/L 硫酸，有刺激性，防止接触皮肤、眼睛与粘膜等。
（9）血清稀释液、对照血清与酶标抗体中含有微量防腐剂，应防止与皮肤接触。
（10）试验废料、废水等应做无害化处理，以免污染环境。
（11）严格按照说明书操作，特别注意控制反应时间。建议每批试剂盒先做预试验，确定底物的最佳作用时间。底物作用15分钟，加终止液后，如果阴性对照OD450nm值低于1.0，应注意试剂温度，可适当延长反应时间至30分钟。如果作用15分钟后阴性对照OD450nm值大于2.0，应适当缩短显色时间。
（12）严格遵守这些条款可以获得理想的结果，特别是液体用量、作用时间和温度必须准确。
【规格】 180头份／盒
【贮藏与有效期】 2℃～8℃保存，有效期为12个月。
新兽药背景介绍
据瑞普生物介绍，口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，FMDV）引起的、发生于牛、羊、猪等偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，世界动物卫生组织（OIE）将其列为动物 A 类烈性传染病，我国将其列为动物一类传染病，严重危害畜牧业的健康发展以及相关产品的对外贸易，对国家的政治、经济具有深远的影响。
口蹄疫病毒非结构蛋白 3ABC 阻断 ELISA 抗体检测试剂盒采用非结构蛋白 3A 单克隆抗体作为捕获抗体、采用原核表达的口蹄疫病毒非结构蛋白 3ABC 作为抗原、非结构蛋白 3B 单克隆抗体作为检测抗体，建立的一种特异性高、敏感性强、重复性好的血清学阻断 ELISA 方法，可用于区分口蹄疫病毒感染动物、口蹄疫全病毒抗原疫苗免疫动物、口蹄疫病毒标记疫苗免疫动物，本试剂盒是“口蹄疫 O 型、A 型二价 3B 蛋白缺失表位疫苗（O/rV-1 株+A/rV-2 株）”的关键配套技术，是我国各省（市）口蹄疫流行病学监测诊断和疫病净化的首选工具。
来源：大畜牧综合农业农村部和企业公告
